最近实验室的小师弟遇到点麻烦,抗体浓度给弄错了。谁能想到呢,听了一场抗体讲座,他信心满满地说:“今天我就要把实验给补上。”结果呢?查文献、定抗体、画实验步骤、养细胞,整套流程一气呵成,可把他给累坏了。可第二天清晨,师姐推门一看,这小师弟正对着新到的抗体抓耳挠腮,“工作浓度明明写进了实验方案啊”,可他怎么也找不到原始浓度呢。 别慌,让我来教你三步找回实验节奏。 首先,先看看管壁吧。90%的抗体管身上都会有原始浓度的信息,位置一般在标签下方或者侧面的小字里。要是找不到的话,也别慌张。打开abcam官网,输入货号进去,再输入批次号,浓度数据立马就跳出来了。 但是呢,有时买到的可能是未纯化样品,比如腹水、培养上清或者多抗血清。这些管壁上往往没有标明浓度信息。这种情况下也别着急,先参考一下这个稀释比例表试试。按照表格里的比例进行稀释,再根据条带亮度做些调整。 不过要注意的是这个表格给出的只是一个预测范围,实际浓度可能会有20%到50%的浮动哦。所以最终稀释比例还得根据实验结果来验证才行。 最后记得把今天这个小插曲当成是一个惊喜吧,“错误”就是下一轮成功的跳板。毕竟抗体浓度找回来也只是实验的开始。最终的目标是重复可再现的条带还有准确可靠的数值嘛。只要掌握了这三步技巧,“完美”翻车的“鸡血实验日”就能变成稳稳出结果的WB!