有那么一根色谱柱，你可能觉得新买来就能用一辈子，结果发现刚用几天它就分叉、前沿、拖尾，柱效变得很差；而有的人就能让同一根柱子稳定工作好几年。这种差异到底是怎么来的？其实是日常操作搞的鬼。要是想让柱子活得久一点，你得掌握正确的使用方法。 大家在使用缓冲盐的时候一定要小心这三个雷区：第一，要是柱压突然飙升，多半是因为缓冲盐析出堵塞了色谱柱里的小缝隙。第二，进样前没彻底冲洗干净，样品跑到了不该去的位置，保留时间就会乱套。第三，盐渗进了硅胶深处破坏了键合相，或者在表面结成膜，柱效立马就会崩塌。 操作缓冲盐流动相的时候有几个细则：首先，使用前要先用不含缓冲盐的流动相冲洗柱子，直到基线平稳为止。而且冲洗时水相比例不能比分析时少，否则容易析出盐块。使用结束后也要用同样水相比例的流动相冲洗三十分钟。如果柱子长期不用，最后还要冲一纯有机相保护层。 还有七条关于缓冲液的铁律要记牢：盐酸盐别碰，会腐蚀钢接头；现配现用才安全；流动相由水和甲醇组成的时候最好先用水过渡一下；pH值要控制在合适范围内；有条件的话可以给流动相加热到30摄氏度；接头里如果有白色结晶可以用10%硝酸清洗；尽量选优级试剂。 如果柱压突然暴涨该怎么办？别急着换柱子。先试着反接高水相的流动相来冲洗一下，利用压力差把堵塞物冲出来。如果这招不管用就把进样端的筛板拆下来用水和甲醇分别超声清洗一下。如果还是不行，就把受污染的填料挖掉直到露出白色硅胶为止。 想让柱子越老越结实得养成好习惯：每次新开柱子都要做性能测试存档；样品得用流动相溶解、再过预柱除杂、最后过滤一下；流动相要有溶解力、惰性低、黏度低这些特点；流速要控制在最佳状态；反相柱推荐用甲醇而不是乙腈；正相柱最好用石油醚或者提纯己烷；用水的话必须是高纯度超纯水。 当柱头塌陷时别慌：如果是填料下沉形成了空腔，卸开螺丝往里填上同粒度填料再压实一下就行。最后还要平衡一两个小时让小空间消失。 说到底还是那句老话管用：“用前要过滤，用后需冲洗”。把这口诀贴在操作台上照着做，你的色谱柱至少能多活一年。