AZDye 488 Tetrazine这东西是个很强的荧光染料，名字里带了四嗪，核心是用了磺化罗丹明110的结构。一说到它的英文名就叫AZDye 488 Tetrazine，中文名还是AZDye 488 四嗪，激发波长在493纳米，发射波长是517纳米。别看它个头不大，分子量也就703.66，荧光量子产率能接近100%，光线照着它也特别稳，长时间拍照片信号也不会掉。 它有两种形式卖，一是固体的粉末，二是溶在有机溶剂或者水里。端基取代率高得很，差不多有95%以上。不过这东西有点娇气，千万别老是冻了又融，最好放在暗柜子里存着，用完的溶液马上就得用，如果没用完就得把它分装成小份冻到零下20摄氏度以下。 这个染料之所以牛，是因为它是把高性能的荧光部分跟四嗪这个生物正交基团连在了一起。凭借这个结构加上超好的光学性能，它在给生物分子打标记、看活细胞长什么样，还有做那些生物正交反应里都挺管用。咱们就从它的化学性质、怎么反应、能做啥以及有啥优势这些方面详细聊聊。 先看荧光报告那部分——AZDye 488。它最大的长处就是能被488纳米的激光一照就亮绿光，发射波长正好是517纳米，跟488激光线配合得特别好。而且它比传统的荧光素还要稳定得多。再来说说生物正交反应那部分——四嗪。这玩意反应特别快，只要遇上带环张力的烯烃或者炔烃（比如反式环辛烯TCO），就能发生那种超快的逆电子需求狄尔斯-阿尔德反应（IEDDA），立马就形成稳定的共价键。 pH值在4到10之间它都能稳定发光，水性又好，这么小的分子能轻松穿透细胞膜去给生物分子贴上标签。它的最大亮点是跟TCO修饰的生物分子反应特别迅速，二级反应速率常数能达到30,000 M⁻¹s⁻¹，绝对是最快的几个生物正交反应之一。 这种速度让它在好几个地方都很厉害： 第一是看活细胞动态成像。不需要铜催化剂或者高温条件，就在生理环境里就能搞定，这样就不会把细胞弄死了。比如说想看TCO修饰的蛋白质怎么在细胞里跑来跑去或者信号通路咋激活的，用这个就能在毫秒级别的时间里看到画面。 第二是给体内的癌症做成像。先往身体里打一针TCO修饰的肿瘤靶向分子（比如抗体或者肽），再打一针AZDye 488 Tetrazine，肿瘤组织很快就能被标上亮闪闪的荧光，给手术导航的时候就能看得特别清楚。 第三是做多色共聚焦显微镜。它发的绿光跟蓝的、橙的还有红的染料都不打架，可以跟Cy3、Cy5这些探针一块用。 除了它本身外还有不少相关试剂呢：Tetrazine-iFluor 488、AF 488 Tetrazine、Alexa Fluor 488 Tetrazine、DyLight 488 Tetrazine、CF 488 Tetrazine、JF 488 Tetrazine、Atto 488 Tetrazine、Cy3B Tetrazine、5-TAMRA Tetrazine、6-ROX Tetrazine、FAM Tetrazine、TAMRA Tetrazine、Cy5 Tetrazine、Cy7 Tetrazine、Sulfo-Cyanine3 Tetrazine、Cyanine5.5 Tetrazine、BD Horizon V500 Tetrazine、Pacific Blue Tetrazine、SiR 488 Tetrazine这些都能配着用。