无rnase的1m dtt 溶液

各位看官,在分子生物学这块儿,无RNase的1M DTT溶液那可是个宝贝。大家知道,DTT是个还原剂,Dithiothreitol,大名鼎鼎的二硫苏糖醇,它在RNA研究、蛋白质电泳还有DNA/RNA提取这些实验里那是出了名的好使。特别是做RNA提取的时候,咱往往得用它来配个10mM或者100mM的工作浓度。为啥?这就为了防止RNA在这过程中被降解。另外,在蛋白质电泳里,它能把蛋白质内部的二硫键给搞断,让样品保持变性状态,好把那些蛋白质亚基给分离开来。不仅如此,DTT还能把金属离子给抓起来,抑制住RNA酶的活性,这是为了更好地保护RNA分子不被破坏。 所以啊,这时候咱们就得小心翼翼地操作了。给移液器吸头和离心管换上无RNase的才行,千万不能碰那些有RNase污染的表面,这交叉污染可是要命的。大家还得留意一点,DTT溶液这玩意儿在空气中特别容易被氧化,颜色从无色变成淡黄色就说明它的还原能力下降了,这时候就得重新配一瓶新的了。虽说DTT的毒性比起巯基乙醇要低不少,但咱们还是得小心点,最好戴上手套穿上实验服。 制备无RNase的1M DTT溶液看着不难,但对无菌和防污染的要求可是相当高的。只有把操作规程和保存方法给盯紧了,咱们才能保证DTT的还原能力不下降。这样一来,就能稳稳地保护好RNA样本的完整性了,不管是后续做RT-PCR还是RNA测序这种下游实验,都能给咱们提供一个可靠的保障。