平板上出现“零菌落”现象的时候,你要先检查一下菌种是不是自身出了问题。

平板上出现“零菌落”现象的时候,你要先检查一下菌种是不是自身出了问题。有时候,菌株经过连续传代十几次,就跟退休的人一样,活性直接断崖式下跌。野外分离的菌株往往营养需求很高,给它普通平板就别指望它能“开口吃饭”了,你得给它特别补充营养。刚收到的菌种还处于休眠状态,别着急直接上板,先给它“热身”扩大培养一下。如果样品里本身就含菌量少,或者带有抑菌成分,那刚接种的菌很快就被团灭了。另外,部分商品化改造的益生菌、菌肥或者食用真菌一旦做了基因改造,就丧失了连续传代能力。 在操作过程中也有很多细节需要注意。容器清洗不干净就会导致平板无法生长。培养基称量和配比稍微有误差也会使营养结构失衡。高温灭菌时要注意别把那些对温度敏感的成分给“煮废”。培养基在不同温度下pH值会发生变化,倒平板前一定要重新确认一下。稀释接菌时如果算错梯度或者搞错操作顺序,实际接种量就会变成零。培养条件也得匹配好菌种的需求,比如需氧、厌氧还是微需氧环境。 再来说说培养基本身的问题。即使是大品牌的产品如果批次不合格或者原材料纯度低了也会让整个培养基失效。特殊培养基存放不当很容易受到光照、温度或密封的影响而营养流失。就算是刚过期几天的培养基里面的维生素、氨基酸也会流失50%以上。有些特殊的菌株需要特定的微量元素才能正常生长。成品培养基在运输和储存过程中pH值也会发生变化。