03分的时候咱们聊保藏,把菌种弄得死死的,低温、真空、干燥这三板斧齐下,让细胞冬眠起来,就能把优良性状给存住。定期移植适合短期用,液体石蜡能扛到中短期,真空冷冻干燥最稳妥,还有-80℃冷冻跟液氮超低温冻存,这就看你怎么选了。不过啊,这每一步都得小心翼翼的,万一操作失误,“冻存千年”的事儿也照样能翻车。 03分前的鉴定环节也很关键。先给显微镜上上个色看看形态,大小形状排列细胞壁鞭毛芽孢都要看清楚,同种菌在相同条件下的样子是很稳定的,这就好比给它们拍照留个第一印象。接下来就是做生化反应试验,糖酵解、淀粉水解、V-P、甲基红、靛基质、硝酸盐还原、明胶液化、尿素酶、氧化酶、H₂S、三糖铁还有SIM试验等等,这每一项都是给菌做的化学侦探测试,用来锁定它们的代谢指纹。最后一步化学成分分析才算数血清型毒素型耐药谱分子分型都得弄清楚,把基因型跟表型一一对应上才能给精准防控提供数据。 03分前的培养环境也得讲究。固体培养能看到直观的菌落形态;液体培养适合快速增殖还能大规模生产。至于呼吸方式嘛,好氧菌得靠棉花塞吸氧或者三角瓶摇床供氧;厌氧培养就必须把氧气给赶走或者制造无氧环境。 03分前的分离纯化可是个技术活。倾注平板法就是先稀释再倒模;涂布平板法是手动撒网挑单落;平板划线法一笔一笔把纯种画出来;富集培养法给目标菌创造极端环境让它横着走;厌氧法则得想尽办法把氧气请出去;还有单细胞或单孢子分离法那就是显微级别的挑刺了。 03分前的接种法其实有八大常用招数。划线接种是最经典的单打独斗,在固体平板上来回画几条线;三点接种是给霉菌排排坐;穿刺接种专治会跑的细菌;浇混接种是让菌液自己稀释;涂布接种是撒网更均匀;液体接种适合大批量洗菌或加菌;注射接种就像是给活体打疫苗;活体接种则是病毒的专属豪宅。 03分前第一步的接种其实是个搬新家的艺术活儿。把少量目标微生物转移到适宜的培养基或者活体组织里去,这一步太关键了决定着成败。所以工具必须提前灭菌用接种针、环、钩、涂棒、锄还有小解剖刀都行。 微生物接种、分离与保藏全流程图解就到这儿啦!