cy5 荧光染料

最近在了解荧光染料,不得不说CY5单体确实挺有意思的。它属于花菁类家族,化学结构里有两个含氮杂环被多甲川链连起来,两边还连着氰基(-CN)。这结构让它的荧光特性非常独特,分子式C35H42N2O2,分子量大概是522.72克每摩尔。吸收波长大约在646到650纳米之间,发射波长落在662到670纳米,正好处于近红外区。高荧光量子产率大约在0.2到0.3,只要浓度不高就能发出很强的光。它的光稳定性特别好,经得起长时间的激发,很适合做长时间成像的实验。 这种染料的外观是深蓝色或者蓝紫色的结晶粉末。溶解性上呢,在DMSO、DMF、甲醇、乙醇这些极性溶剂里溶解得很好,但在水里溶解度就比较低了。不过如果引入磺酸基团比如Sulfo-CY5,水溶性就能大大改善。储存的时候最好避光干燥放着,别晒强光或者碰到氧化剂,不然容易把荧光淬灭掉。 这东西用途挺广的。细胞成像的时候可以用来标记抗原或者分子,用近红外显微镜看细胞形态和相互作用。活体成像也很方便,利用近红外光的穿透性来追踪细胞或纳米颗粒在体内的情况。组织切片染色的时候跟DAPI配着用效果更好。流式细胞术里给抗体或者表面标志物标上CY5,就能分析细胞亚群分布或者周期状态了。比如检测CD4、CD8这种免疫细胞的表面标志物就经常用这个。 核酸标记也没问题,做基因芯片的时候把样本的cDNA标上CY5,对照样本用Cy3标记做双色杂交分析基因表达差异。荧光原位杂交(FISH)和实时定量PCR(qPCR)也能用得上。 做药物递送或者治疗监测的时候给脂质体或者纳米粒标上CY5就能追踪分布和释放了。把靶向配体标上以后构建靶向系统效果会更好。 研究生物分子相互作用的时候它也能当荧光供体或者受体参与FRET实验。比如把互补的DNA链标记上观察杂交过程中的变化就能分析结合动力学。 它最大的优势就是组织穿透性强、背景干扰小,适合活体和深层检测。灵敏度高适合低浓度样品的检测。光稳定性好保证了实验结果的可靠。生物相容性也好,低浓度下对细胞没什么毒性。 最后提醒一下这产品只能用于科研不能用于人体。相关产品像Cy3 amine(CY3 NH2)、CY3-N3Sulfo还有Cy5 azide、CY5 COOH这些都挺多的呢。