给大伙儿说说DMSO(二甲基亚砜),它在制作FITC-Transferrin的时候特别重要。先把FITC溶在DMSO或者碳酸氢钠缓冲液里,然后用PBS(磷酸盐缓冲液)溶解Human(人源)转铁蛋白。等两者的摩尔比调好后,在室温下避光反应,让FITC异硫氰酸酯基团去亲核加成赖氨酸残基的伯胺,生成稳定的硫脲键。反应完了得用透析或者凝胶过滤法把没结合上的游离FITC给洗干净。最后还得做SDS-PAGE电泳看看分子量有没有变,再用受体结合实验确认下亲和力还在不在。 FITC标记的就是这个FITC-Human Transferrin,它是荧光素和Human Transferrin的复合体。因为转铁蛋白有很多赖氨酸位点,正好能接上FITC的那个-N=C=S基团。这样搞出来的分子不仅能像原来那样结合铁和受体,还带上了绿色的荧光。它的激发光和发射光正好配常规显微镜用,荧光强还稳定,适合长时间看动态变化。虽然分子量涨了点,但功能没怎么受影响,还是能通过TfR(转铁蛋白受体)这个高亲和力把手牵着进去内吞。 这个东西在实验室里用得可多了。作为一种模型配体,它能实时观察转铁蛋白是怎么从细胞膜跑到内体的,搞清楚膜转运的机制。还能用来追踪铁在细胞里的走向,看看铁是怎么被吸收、储存还有释放的。肿瘤细胞表面的TfR通常都很多,拿它来当探针能识别肿瘤细胞并成像,方便研究肿瘤微环境。要是搞药物递送,还能把它贴在纳米载体表面做修饰,靠受体帮忙让药更集中在靶组织上。 最后再唠叨一句,咱们新维创的产品都是按科研标准做的质检。但要注意啊,这系列产品只能做研究用,千万别拿去做人体实验或者治病什么的哦!